开心生肖歡迎您的到來!

您的位置:首頁 > 新聞中心
凍幹機多少錢一台,微生物菌種如何使用凍幹機
作者:上海那艾 浏覽:

近年來國内的凍幹技術水平日益提高,企業也在賦予凍幹機新的動能,比如智能化、信息化等。當然,凍幹機行業也不忘規範化地發展。凍幹機起源于19世紀20年代的真空冷凍幹燥技術,凍幹機多少錢一台後真空凍幹技術除了在醫藥上有着廣泛應用,在生物制品、食品、血液制品、活性物質領域之外的領域也發揮了重要作用。下面小編為大家介紹下微生物菌種的冷凍幹燥保藏操作流程:

  凍幹機适用于大多數細菌、放線菌、病毒、噬菌體、立克次體、黴菌和酵母等的真空冷凍幹燥保藏,但不适于黴菌的菌絲型、菇類、藻類和原蟲等。其操作流程如下:

  1、安瓿管準備

  安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗幹淨後,用蒸餾水浸泡至pH中性,幹燥後、貼上标簽,标上菌号及時間,加入脫脂棉塞後,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。

  2、保護劑的選擇和準備

  保護劑種類要根據微生物類别選擇。凍幹機多少錢一台配制保護劑時,應注意其濃度及pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過濾滅菌;牛奶要先脫脂,用離心方法去除上層油脂,一般在100℃間歇煮沸2-3次,每次10-30分鐘,備用。

  3、凍幹樣品的準備

  在适宜的培養條件下将細胞培養至靜止期或成熟期,進行純度檢查後(參見科技部自然科技資源平台聯合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術規程》(試行)),與保護劑混合均勻,分裝。微生物培養物濃度以細胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜(以大腸杆菌為例,為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升,隻需10毫升瓊脂斜面兩支)。采用較長的毛細滴管,直接滴入安瓿管底部,注意不要濺污上部管壁,每管分裝量約0.1-0.2毫升,若是球形安瓿管,裝量為半個球部。若是液體培養的微生物,應離心去除培養基,然後将培養物與保護劑混勻,再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短,zui好在1-2小時内分裝完畢并預凍。分裝時應注意在無菌條件下操作。

  4、預凍

  一般預凍2小時以上,溫度達到-20℃到-35℃左右。

  5、冷凍幹燥

  采用凍幹機進行冷凍幹燥。将冷凍後的樣品安瓿管置于冷凍幹燥機的幹燥箱内,開始冷凍幹燥,時間一般為8-20小時。

  終止幹燥時間應根據下列情況判斷:

  安瓿管内凍幹物呈酥塊狀或松散片狀;

  真空度接近空載時的zui高值;

  樣品溫度與管外溫度接近;

  選用1-2支對照管,其水份與菌懸液同量,視為幹燥完結;

  選用一個安瓿管,裝1-2%氯化钴,如變深蘭色,可視為幹燥完結;

  冷凍幹燥完畢後,取出樣品安瓿管置于幹燥器内,備用。

  6、真空封口及真空檢驗

  将安瓿管頸部用強火焰拉細,然後采用真空泵抽真空,在真空條件下将安瓿管頸部加熱熔封。熔封後的幹燥管可采用高頻電火花真空測定儀測定真空度。

  7、保藏

  安瓿管應低溫避光保藏。

  8、質量檢查

  冷凍幹燥後抽取若幹支安瓿管進行各項指标檢查,如存活率、生産能力、形态變異、雜菌污染等。新版GMP附錄1第三章第十一條規定應當對各個潔淨級别的微生物進行動态監測,以評估無菌生産的微生物狀況。其中監測方法包含沉降菌法、定量空氣浮遊菌采樣法和表面取樣法等。與此同時,新版GMP更強調在關鍵操作的全過程均應該對A級潔淨區進行懸浮粒子和微生物監測。使灌裝與凍幹區域相連接的半自動進出料裝載機構以L型布局形式出現,與以往的老式凍幹機的大開門式相比較,因良好的隔離操作,環境控制更趨向于理性的數據控制,且無菌控制的可信度大大增加,L型布局的合理設計使A級區域更集中,在環境監測時,監測點也更容易把握,便于實施。


下一篇: 沒有了!